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大鼠抑制素BElisa試劑盒使用說明書

  • 發布日期:2014/11/26      瀏覽次數:807
  • 提 供 商: 上海恒遠生物科技有限公司 資料大小: JPG
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    大鼠抑制素B(INH-B)Elisa試劑盒使用說明書

    本試劑盒僅供研究使用。

    檢測范圍:96T

    2.5ng/L-160ng/L

    使用目的:

    本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中抑制素B(INH-B)含量。

    實驗原理

    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本大鼠抑制素B(INH-B)水平。用純化的大鼠抑制素B(INH-B)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抑制素B(INH-B),再與HRP標記的抑制素B(INH-B)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抑制素B(INH-B)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品大鼠抑制素B(INH-B)濃度。 

    試劑盒組成 

    1

    30倍濃縮洗滌液

    20ml×1瓶

    7

    終止液

    6ml×1瓶

    2

    酶標試劑

    6ml×1瓶

    8

    標準品(160ng/L)

    0.5ml×1瓶

    3

    標包被

    12孔×8條

    9

    標準品稀釋液

    1.5ml×1瓶

    4

    樣品稀釋液

    6ml×1瓶

    10

    說明書

    1份

    5

    顯色劑A液

    6ml×1瓶

    11

    封板膜

    2張  

    6

    顯色劑B液

    6ml×1/瓶

    12

    密封袋

    1個

    標本要求 

    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融

    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    操作步驟

    • 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

    80ng/L

    5號標準品

    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

    40ng/L

    4號標準品

    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

    20ng/L

    3號標準品

    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

    10ng/L

    2號標準品

    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

    5ng/L

    1號標準品

    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

    • 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻
    • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
    • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
    • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
    • 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
    • 溫育:操作同3。
    • 洗滌:操作同5。
    • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
    • 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
    • 公司能提供的酶聯免疫試劑盒種類有:大象、牛、大鼠、小鼠、人、馬、兔、大熊貓、類人猿、蜥蜴、蝌蚪、菠菜、羊、犬、魷魚、蝸牛、扁豆、豌豆、馬鈴薯、蟈蟈、豚鼠、倉鼠、金黃地鼠、鵝、鴿子、禿鷲、河馬、犀牛、野豬、東北虎、斑鳩、蚯蚓、鯉魚、眼鏡蛇、青蛙、丹頂鶴、鳥類等動植物種屬

     
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