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伏馬毒素ELISA試劑盒說明書

  • 發布日期:2013/7/12      瀏覽次數:1078
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    本試劑盒僅供研究使用。

    伏馬毒素ELISA試劑盒使用目的:

    本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血

    清和尿樣中伏馬毒素(FB1)殘留的定量檢測。

    伏馬毒素ELISA試劑盒實驗原理

    本試劑盒采用競爭ELISA 方法,在微孔板包被有伏馬毒素(FB1)偶聯抗原,加入伏

    馬毒素(FB1)標準品或樣品,游離伏馬毒素(FB1)與微孔條上預包被的伏馬毒素(FB1

    偶聯抗原互相競爭抗伏馬毒素(FB1)抗體酶標記物,用TMB 底物顯色,加入終止液后顏

    色由藍色變為黃色,用酶標儀在450nm 波長下進行檢測,吸光值與樣品中伏馬毒素(FB1

    含量成反比,通過標準曲線計算樣品中伏馬毒素(FB1)的含量。

    伏馬毒素ELISA試劑盒組成

    預包被的伏馬毒素(FB1)偶聯抗原的可拆酶標板:1 塊(12 孔×8 條)。

    伏馬毒素(FB1)標準品:6 瓶(1ml/瓶),含量分別是: 0 ppb0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7

    ppb,8.1 ppb

    抗伏馬毒素(FB1)抗體酶結合物:1 瓶(6ml)。

    顯色液A1 瓶(6ml)。

    顯色液B1 瓶(6ml)。

    終止液:1 瓶(6ml),2M 硫酸。

    樣本稀釋液:1 瓶(10×, 6ml),用于樣品稀釋用。

    濃縮洗滌液:1 瓶(20×,20ml),用于洗板。

    說明書一份。

    伏馬毒素ELISA試劑盒貯存:

    1.試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍

    2.未用完的微孔板應該密封干燥保存

    伏馬毒素ELISA試劑盒注意事項

    1.使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。

    2.不要使用過期試劑盒。

    3.試劑盒使用前,將試劑恢復至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。

    4.標準品中含有伏馬毒素(FB1),使用時應特別注意,操作時應帶手套。

    5.終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。

    6.不同標準品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結果。

    7.不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標準品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響

    實驗結果。

    8.稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實驗結果

    9.混合試劑時應避免起泡。

    伏馬毒素ELISA試劑盒工作液準備

    伏馬毒素(FB1)標準品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb

    濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用

    樣本稀釋液:備用

    顯色劑:已備用,避免光線直照

    反應終止液:已備用

    伏馬毒素ELISA試劑盒樣品處理:

    10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液

    強力振蕩3分鐘

    Whatman 濾紙過濾

    25μl處理后的樣品,加入25μl樣本稀釋液于反應孔中(樣本稀釋倍數為2

    伏馬毒素ELISA試劑盒結果計算

    定量分析:

    所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以*個標準(0標準)

    的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。

    B 標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值

    B0 0μg/L標準溶液的平均吸光度值

    以伏馬毒素(FB1)濃度的對數值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標準曲線圖。根

    據樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應點的橫坐標,即為伏馬毒素(FB1)濃度的對數

    值,求得反對數即為測定液中伏馬毒素(FB1)濃度Cppb

    由于樣品經過了預先稀釋,因此根據標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋

    倍數。

    半定量測定:

    目測半定量測定:首先選擇一個適當的標準液與樣品同運行,根據樣品與標準品吸光

    度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。

    儀器半定量測定:首先選擇一個適當的標準液與樣品同運行,根據樣品與標準品顏色

    深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。

     
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