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化學發光免疫分析技術

  • 發布日期:2013-08-06      瀏覽次數:1700
    • 化學發光免疫分析法以標記方法的不同而分為兩種:
      (1)化學發光標記免疫分析法;
      (2)酶標記、以化學發光底物作信號試劑的化學發光酶免疫分析法
      化學發光標記免疫分析
      化學發光標記免疫分析又稱化學發光免疫分析(CL IA ) , 是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學發光物質有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) , 是有效的發光標記物[ 3 ] , 其通過起動發光試劑(N aOH2H2O 2 ) 作用而發光, 強烈的直接發光在一秒鐘內完成, 為快速的閃爍發光。吖啶酯作為標記物用于免疫分析, 其化學反應簡單、快速、無須催化劑; 檢測小分子抗原采用競爭法, 大分子抗原則采用夾心法 , 非特異性結合少, 本底低; 與大分子的結合不會減小所產生的光量, 從而增加靈敏度。
      化學發光酶免疫分析
      從標記免疫分析角度, 化學發光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 應屬酶免疫分析, 只是酶反應的底物是發光劑, 操作步驟與酶免分析*相同[ 5 ]: 以酶標記生物活性物質(如酶標記的抗原或抗體) 進行免疫反應, 免疫反應復合物上的酶再作用于發光底物, 在信號試劑作用下發光, 用發光信號測定儀進行發光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(AL P) , 它們有各自的發光底物。

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